脂肪酸甲酯中游離甘油含量的測(cè)定是根據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T28769-2012進(jìn)行的，根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)，可以選擇上海密通SYP-28769脂肪酸甲酯中游離甘油含量試驗(yàn)器進(jìn)行測(cè)定。

警告:本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用可能涉及某些有危險(xiǎn)性的材料、操作和設(shè)備,但并未對(duì)與此有關(guān)的所有安全問(wèn)題都提出建議。用戶在使用本標(biāo)準(zhǔn)前有責(zé)任制定相應(yīng)的安全和防護(hù)措施,并確定相關(guān)規(guī)章限制的適用性。

1范圍

1.1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了采用氣相色譜法測(cè)定脂肪酸甲酯(FAME)中質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍為0.005%~0.07%的游離甘油含量的方法。

1.2本標(biāo)準(zhǔn)適用于評(píng)價(jià)純態(tài)生物柴油的脂肪酸甲酯的質(zhì)量。甘油作為酯交換反應(yīng)的副產(chǎn)物,其濃度會(huì)影響燃料的性能。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是bi不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修gai單)適用于本文件。

GB/T 4756石 油液體手工取樣法(GB/T 4756- -1998 ,eqv ISO 3170:1988)

GB/T 15687動(dòng)植物油脂試樣 的制備(GB/T 15687- -2008 ,ISO 661 :2003 ,IDT) .

3術(shù)語(yǔ)和定義 ，

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

游離甘油含量free glycerol content

動(dòng)植物油脂經(jīng)酯交換反應(yīng)并將甘油相分離后殘存于脂肪酸甲酯中的少量甘油。

4方法概要

將乙醇、水和正已烷及一定量的內(nèi)標(biāo)物加入到已知量的試樣中,使混合物形成兩相。游離甘油定量轉(zhuǎn)移至下層溶液中。采用氣相色譜法測(cè)定下層溶液以定量確定游離甘油的含量。

5試劑和材料

如非特別說(shuō)明,所有試劑均為分析純。

5.1 正己烷。

5.2 1,4丁二醇 :純度不低于99%。

5.3 乙醇 :純度不低于95%。

5.4 甲酸:純度不低于 99%。

5.5甘 油:純度不低于99%。

5.6載氣:氦氣或氫氣,符合氣相色譜載氣要求,一 般純度不低于99. 99 %。

5.7輔 助氣體:

----氫氣:純度不低于99.99%,不含水和有機(jī)化合物;

----空氣:干燥空氣,不含有機(jī)化合物。

5.8 內(nèi)標(biāo)物溶液:在100 mL容量瓶中準(zhǔn)確稱量約80 mg(精確至0.1 mg)1,4-丁二醇,用少量蒸餾水溶解,加入1mL甲酸,用蒸餾水稀釋至刻度。按此步驟制備的溶液在室溫下可以穩(wěn)定存放24h。

6儀器

6.1 具備有下列配置的氣相色譜儀。

6.1.1色譜柱箱 :設(shè)定溫度的控制精度為士1 C。

6.1.2進(jìn)樣口 :分流/無(wú)分流進(jìn)樣口或填充柱進(jìn)樣口。

6.1.3火焰離子化檢測(cè)器(FID)及信號(hào)轉(zhuǎn)換/放大系統(tǒng)。

6.1.4 記錄儀/積分儀:能夠與信號(hào)轉(zhuǎn)換/放大系統(tǒng)連接使用，最大響應(yīng)時(shí)間小于1 s,繪圖速度可以調(diào)節(jié)。

6.1.5毛細(xì)管 色譜柱:類型為PoraPLOT Q,長(zhǎng)度10 m,內(nèi)徑0.32 mm,液膜厚度10 靘(見(jiàn)注),或采用固定相為CHROMOSORB 101,內(nèi)徑4 mm,長(zhǎng)度1 m的填充柱。采用的色譜柱應(yīng)滿足甘油和內(nèi)標(biāo)物的色譜峰*分離(兩色譜峰之間的基線接近零點(diǎn)),分析時(shí)間小于15 min,并且按照9.3測(cè)定得到的甘油的校正因子不超過(guò)2.5。

注:已注意到不同生產(chǎn)商所提供的毛細(xì)管色譜柱的性能存在差別,有些在使用中會(huì)帶來(lái)一些問(wèn)題。有人提出使用游離脂肪酸分析用固定相(FFAP)或聚乙二醇固定相的毛細(xì)管色譜柱。無(wú)論使用何種類型色譜柱,其分離效果需滿足指標(biāo)要求。

6.1.6流量控制器,用于載氣和輔助氣流量控制。

6.2氣相色 譜用微量注射器:5 ul或10 ul。

6.3 容量瓶:50 mL和100 mL。

6.4 移液管:1 mL。

6.5帶刻度移液管 :5 mL。

6.6分析天平:感量0.1 mg。

6.7玻璃錐形離心試管:10mL。

6.8離心機(jī):轉(zhuǎn)速可達(dá)到2000r/min。

7取樣

7.1按照GB/T4756的方法取樣。

7.2取樣過(guò)程應(yīng)考慮到脂肪酸甲酯中的游離甘油與玻璃容器有很強(qiáng)的親和性,因此應(yīng)避免使用玻璃容器收集和儲(chǔ)存樣品,可使用合適的塑料容器。

8試樣制備

按照GB/T15687的要求準(zhǔn)備試樣。試樣不能加熱或過(guò)濾。

9操作步驟

9.1 色譜條件

9.1.1毛細(xì)管 柱可使用下列條件:

-----不分流模式:

a)色譜柱箱溫度 :初溫150 C,保持1 min,升溫速率40 C/min,終溫210 C,保持12 min;

b) 進(jìn)樣口溫度:250 °C;

c) 檢測(cè)器溫度:250 C;

d) 進(jìn)樣0.5 min后打開(kāi)分流閥，分流比約20: 1;

e)載氣流量:3 mL/ min。

------分流模式:

a)色譜柱箱溫度:210 C;

b) 進(jìn)樣口溫度:230 C;

c) 檢測(cè)器溫度:250 C;

d)分流比:約 50: 1;

e) 載氣流量:1 mL/ min~2 mL/ min.

9.1.2填充柱可使用下列 條件:

----色譜柱箱溫度:200 C;

-----進(jìn)樣口溫度:230 °C;

-----檢測(cè)器溫度:250°C;

------載氣流量:20 mL/ min~30 mL/ min。

注:推薦采用毛細(xì)管柱的不分流進(jìn)樣模式色譜條件,以保證測(cè)定的靈敏度。

9.2色譜峰定性

根據(jù)相同條件下甘油和內(nèi)標(biāo)物的保留時(shí)間可以確定試樣中甘油和內(nèi)標(biāo)物的色譜峰。圖1為典型色譜圖。

9.3甘油校正因子的測(cè)定

準(zhǔn)確稱量約100 mg(精確至0. 1 mg)甘油和100 mg(精確至0.1 mg)1,4-丁二醇于100 mL容量瓶中,加入50mL乙醇(見(jiàn)5.3)溶解,并用蒸餾水稀釋至刻度。配制過(guò)程中注意水/醇混合時(shí)的放熱效應(yīng)和體積的減少。取1霯此混合溶液注人色譜系統(tǒng)并按照前述色譜條件進(jìn)行分析,至少平行測(cè)定三次，計(jì)算甘油的校正因子。該溶液在室溫下可以穩(wěn)定儲(chǔ)存幾周。根據(jù)色譜圖結(jié)果和式(1)計(jì)算甘油的校正

因子Fr:

式中:

A1 ------1,4-丁二醇峰面積;

A2 -----甘油峰面積;

M1-----溶液中1,4-丁二醇的質(zhì)量, 單位為毫克(mg);

M2------溶液中甘油的質(zhì)量,單位為毫克(mg)。

按照式(2)計(jì)算的甘油校正因子F,應(yīng)不超過(guò)2.5(見(jiàn)6. 1.5中注)。

9.4定量分析

9.4.1 試樣準(zhǔn)備

稱量約3.5 g(精確至0.1 mg)試樣(約4 mL)于10 mL離心試管中,加人1 mL乙醇(見(jiàn)5.3),輕輕

振搖使混合均勻。準(zhǔn)確加入1 mL內(nèi)標(biāo)物溶液(見(jiàn)5.8)和4 mL正已烷,蓋緊試管塞并劇烈振蕩5 min。離心分離15 min。取下層溶液進(jìn)行色譜分析。

9.4.2色譜分析

用微量注射器取約1 霯下層溶液,然后抽人一定量的空氣使針頭中無(wú)溶液滯留(“熱針"技術(shù)),仔細(xì)將注射器及針頭用紙巾擦拭干凈,將注射器針頭通過(guò)隔墊插人進(jìn)樣口,等待5s,快速將試樣注人汽化室,5s后拔出進(jìn)樣針頭。在色譜圖上標(biāo)記進(jìn)樣時(shí)間,甘油色譜峰流出后繼續(xù)幾分鐘。

10 計(jì)算和報(bào)告

根據(jù)積分結(jié)果計(jì)算試樣中的游離甘油的含量。游離甘油的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w(%)按式(2)計(jì)算:

式中:

A1、A2、Fr-----與式(1)中含 義相同;

M1----試樣中加入的1,4丁二醇的質(zhì)量,單位為毫克(mg);

M2----試樣的質(zhì)量,單位為毫克(mg)。

結(jié)果以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)表示,精確至小數(shù)點(diǎn)后第2位。

11 精密度

11.1實(shí)驗(yàn)室間精密度詳細(xì)測(cè)定數(shù)據(jù)見(jiàn)附錄A。據(jù)此得出的精密度值不適用于超出所列試樣類型和濃度范圍的試樣測(cè)試。按照下述規(guī)定判斷試驗(yàn)結(jié)果的可靠性(95%置信水平)。

11.2 重復(fù)性(r)

同一實(shí)驗(yàn)室同-操作人員、采用同一儀器設(shè)備,在相同的實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)同一-試樣兩次重復(fù)測(cè)定結(jié)果之差不應(yīng)超過(guò)表1中重復(fù)性(r)的值。

11.3 再現(xiàn)性(R)

不同實(shí)驗(yàn)室、不同操作人員、采用不同儀器,對(duì)同一試樣兩個(gè)單一和獨(dú)立測(cè)定結(jié)果之差的絕對(duì)值,不應(yīng)超過(guò)表1中再現(xiàn)性(R)的值。

表1測(cè)定重復(fù)性和再現(xiàn)性(r和R)

12 試驗(yàn)報(bào)告

試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)注明:

----識(shí)別試樣的必要信息;

----所用采樣方法;

----分析方法及標(biāo)準(zhǔn)號(hào);

----本標(biāo)準(zhǔn)未列出的操作細(xì)節(jié)，以及有可能影響分析結(jié)果的其他因素;

----測(cè)定結(jié)果(見(jiàn)第 10章)。

附錄A

(資料性附錄)

實(shí)驗(yàn)室間試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)室協(xié)作試驗(yàn)涉及歐洲范圍5個(gè)國(guó)家7個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)5個(gè)試樣的分析結(jié)果。

試樣1:由葵花籽油制備的脂肪酸甲酯。

試樣2:由菜籽油制備的脂肪酸甲酯1。

試樣3:由菜籽油和葵花籽油混合制備的脂肪酸甲酯(75:25)。

試樣4:由菜籽油制備的脂肪酸甲酯2。

試樣5:由菜籽油和葵花籽油混合制備的脂肪酸甲酯(25:75)。

本試驗(yàn)項(xiàng)目由歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)CEN/TC307/WG1工作組于1999年組織進(jìn)行,獲得的試驗(yàn)結(jié)果按照ISO 4259的要求進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,得到的精密度數(shù)據(jù)見(jiàn)表A.1。